Table 1 Ligands and binding protocols used for receptor autoradiography

Glutamate

AMPA

AMPA

[10 nM]

Quisqualate

[10 μM]

50 mM Tris-acetate (pH 7.2)

+100 mM KSCN^b

3 × 10 minutes, 4 °C

45 minutes, 4 °C

1. 4 × 4 seconds

2. Acetone/glutaraldehyde (100 ml/2.5 ml), 2 × 2 seconds, 4 °C

Kainate

Kainate

[9.4 nM]

SYM 2081

[100 μM]

50 mM Tris-acetate (pH 7.1)

+ 10 mM Ca²⁺-acetate

3 × 10 minutes, 4 °C

45 minutes, 4 °C

1. 4 × 4 seconds, 4 °C

2. Acetone/glutaraldehyde (100 ml/2.5 ml), 2 × 2 seconds, 4 °C

NMDA

MK-801

[3.3 nM]

(+)MK-801

[100 μM]

50 mM Tris-acetate (pH 7.2)

+ 50 μM glutamate

+ 30 μM glycine^b

+ 50 μM spermidine^b

15 minutes, 4 °C

60 minutes, 22 °C

2 × 5 minutes

mGlu2/3

LY341495

[1 nM]

l-Glutamate

[1 mM]

10 mM phosphate buffer (pH 7.6)

+ 100 mM KBr^b

2 × 5 minutes, 22 °C

60 minutes, 4 °C

2 × 5 minutes

GABA

GABA_A

Muscimol

[7.7nM]

GABA

[10 μM]

50 mM Tris-citrate (pH 7.0)

3 × 5 minutes, 4 °C

40 minutes, 4 °C

3 × 3 seconds

GABA_B

CGP 54626

[2 nM]

CGP 55845

[100 μM]

50 mM Tris-HCl (pH 7.2)

+ 2.5 mM CaCl₂

3 × 5 minutes, 4 °C

60 minutes, 4 °C

3 × 2 seconds

BZ

Flumazenil

[1 nM]

Clonazepam

[2 μM]

170 mM Tris-HCl (pH 7.4)

15 minutes, 4 °C

60 minutes, 22 °C

2 × 1 seconds

pBZ

PK 11195

[0.1 nM]

PK 11195

[10 μM]

50 mM Tris-HCl (pH 7.4)

15 minutes, 22 °C

60 minutes, 22 °C

3 × 5 minutes

Acetylcholine

M₁

Pirenzepine

[1 nM]

Pirenzepine

[2 μM]

Krebs buffer (pH 7.4)

+ 4 mM KCl

+ 120 mM NaCl

15 minutes, 22 °C

60 minutes, 22 °C

3 × 4 minutes

M₂

Oxotremorine-M

[1.7 nM]

Carbachol

[10 μM]

20 mM HEPES-Tris (pH 7.5)

+ 10 mM MgCl₂

+ 300 nM pirenzepine

20 minutes, 22 °C

60 minutes, 22 °C

2 × 2 minutes

M₃

4-DAMP

[1 nM]

Atropine sulfate

[10 μM]

50 mM Tris-HCl (pH 7.4)

+ 0.1 mM PMSF

+ 1 mM EDTA

15 minutes, 22 °C

45 minutes, 22 °C

2 × 5 minutes

nACh

Epibatidine

[0.5 nM]

Nicotine

[100 μM]

1 mM HEPES (pH 7.5)

+ 120 mM NaCl

+ 5.4 mM KCl

+ 0.8 mM MgCl₂

+ 1.8 mM CaCl₂

20 minutes, 22 °C

90 minutes, 22 °C

5 minutes

Noradrenaline

α₁

Prazosin

[0.2 nM]

Phentolamine mesylate

[10 μM]

50 mM Na⁺/K⁺-phosphate buffer (pH 7.4)

15 minutes, 22 °C

60 minutes, 22 °C

2 × 5 minutes

α₂

UK 14,304

[0.64 nM]

Phentolamine mesylate

[10 μM]

50 mM Tris-HCl (pH 7.7)

+ 100 μM MnCl₂

15 minutes, 22 °C

90 minutes, 22 °C

5 minutes

Serotonin

5-HT_1A

8-OH-DPAT

[1 nM]

5-Hydroxytryptamine

[1 μM]

170 mM Tris-HCl (pH 7.4)

+ 4 mM CaCl₂ ^b

+ 0.01% ascorbate^b

30 minutes, 22 °C

60 minutes, 22 °C

5 minutes

5-HT₂

Ketanserin

[1.14 nM]

Mianserin

[10 μM]

170 mM Tris-HCl (pH 7.7)

30 minutes, 22 °C

120 minutes, 22 °C

2 × 10 minutes

Dopamine

D1

SCH 23390

[1.67 nM]

SKF 83566

[1 μM]

50 mM Tris-HCl (pH 7.4)

+ 120 mM NaCl

+ 5 mM KCl

+ 2 mM CaCl₂

+ 1 mM MgCl₂

20 minutes, 22 °C

90 minutes, 22 °C

2 × 10 minutes

D2

Raclopride

[0.55 nM]

Butaclamol

[1 μM]

50 mM Tris-HCl (pH 7.4)

+ 0.1% ascorbate

+ 150 mM NaCl

20 minutes, 22 °C

45 minutes, 22 °C

6 × 1 minutes

Adenosine

A₁

DPCPX

[1 nM]

R-PIA

[100 μM]

170 mM Tris-HCl (pH 7.4)

+ 2 U/L adenosine deaminase

+ 100 μM Gpp(NH)p^b

15 minutes, 4 °C

120 minutes, 22 °C

2 × 5 minutes

A_2A

ZM 241385

[0.42 nM]

2-Chloroadenosine

[20 μM]

170 mM Tris-HCl (pH 7,4)

+ 2 U/L adenosine deaminase

+ 10 mM MgCl₂

2 × 10 minutes, 22 °C

120 minutes, 22 °C

2 × 5 minutes